GeneticsPCR

Işıkla Aktive Edilen PCR Testi | Medgadget’ı

Almanya’daki Ludwig-Maximilians-Universität München’deki araştırmacılar, polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) testine güç veren enzimlerin ışıkla aktive olan bir formunu geliştirdiler. Test, COVID-19 teşhis aracı olarak kullanılması nedeniyle halk arasında son zamanlarda ün kazandı. Teknik, tasarımı ve oluşturulması zor olan ve yüksek sıcaklıklardan kolayca zarar gören enzimler için uygun olmayan mevcut ısıyla aktive olan enzimlere alternatifler sağlayabilir. Yöntem, PCR ile mümkün olanın kapsamını genişletmeye yardımcı olabilir.

PCR bir süredir piyasada, ancak son zamanlarda bir COVID-19 tanı testi olarak ona büyük ölçüde güvenmeye başladık. Test, SARS-CoV-2 virüsünün varlığını tespit edebilmemiz için küçük miktarlarda DNA’yı amplifiye etmek için çeşitli enzimler kullanır. Bununla birlikte, teknoloji aynı zamanda gen ekspresyonu hakkında paha biçilmez veriler sağlayan tıbbi araştırmaların temel taşıdır.

PCR testine güç veren enzimler biraz titizdir. Numune hazırlama sırasında, enzimler aktif hale gelebilir ve çalışmaya başlayabilir, potansiyel olarak sonuçları etkileyebilir veya numuneyi bozabilir. Bunu aşmak için, araştırmacılar tipik olarak, yalnızca belirli bir sıcaklığa ulaştıklarında aktif hale gelecek enzimler tasarlarlar. Bunlar “sıcak başlangıç” enzimleri olarak bilinir.

Bununla birlikte, sıcak başlangıç ​​enzimlerinin tasarımı zordur ve konsept, özellikle ısıya duyarlı enzimler için işe yaramaz. “PCR’ye dayalı tanı testleri için, örneğin[…] COVID-19 testi için çözüm, yüksek aktivasyon sıcaklığına ulaşılana kadar hiçbir aktivite göstermeyen sıcak başlangıçlı bir enzimin geliştirilmesidir” dedi, araştırmaya katılan araştırmacı Andrés Vera. “Bu sıcak başlatma yaklaşımlarının ana dezavantajı, ısıdan zarar gören enzimler için kullanılamamasıdır. Ayrıca, sıcak başlangıçlı bir enzimin tasarımı sıkıcıdır ve mühendislik yapmak istediğimiz her yeni enzim için yorucu tasarım süreci tekrarlanmalıdır.”

PCR testleri için enzimler oluşturmayı kolaylaştırmak için Vera ve meslektaşları, alternatif olarak ışıkla aktive olan enzimlere yöneldiler. Vera, “Işık kontrollü enzimler uzun bir süredir piyasada, ancak yaklaşımımızı benzersiz kılan şey, hemen hemen her DNA işleme enzimine uygulanabilmesidir” dedi. “Geçmişte enziminizin nasıl çalıştığına dair her zaman çok ayrıntılı bilgiye ihtiyaç duyuyordunuz ve enzimi bloke etmek ve ışıkla yeniden aktive etmek için akıllı bir yol bulacağınızdan asla emin değildiniz.”

Işık aktivasyonunu elde etmek için, araştırmacılar enzime bir DNA parçası bağladılar ve bu da enzimi substratı üzerinde hareket etmeye başlaması için serbest bırakan bir UV ışığı darbesiyle aktive edilebilen inaktif bir enzim ile sonuçlandı. Şimdiye kadar ekip, ışıkla aktive olan enzimlerinin, sıcak başlangıç ​​eşdeğerleri ile benzer veya gelişmiş performans gösterdiğini göstermiştir.

Araştırmaya katılan başka bir araştırmacı olan Philip Tinnefeld, “Bu kesinlikle biyoteknolojik ve teşhis amaçlı kullanım için daha iyi enzimler üretmeye yardımcı olacak” dedi. “Ayrıca, mevcut gerçek zamanlı PCR makineleri zaten ışık kaynakları içeriyor ve bu enzimleri yakın zamanda piyasaya sürmek için kolayca değiştirilebilirler.”

Çalışma Nükleik Asitler Araştırması: Fotoaktive edilebilir DNA işleme enzimleri üretmek için basit ve genel bir yaklaşım

Üzerinden: Ludwig-Maximilians-Üniversite Münih




Source link

Başa dön tuşu

Reklam Engelleyici Algılandı

Lütfen reklam engelleyiciyi devre dışı bırakarak bizi desteklemeyi düşünün